GIỚI THIỆU

Celastrus hindsii là một loài thực vật thuộc họ Celastraceae. Ở Việt Nam, C. hindsii mọc tự nhiên trong rừng và phổ biến là tìm thấy ở một số tỉnh như Hà Nam, Hòa Bình, Quảng Ninh và Ninh Bình.

Hình ảnh cây Xạ đen ngoài tự nhiên

Xạ đen được sử dụng điều trị chứng viêm, và chống ung thư và kháng u thuộc tính [2]. Các nhà khoa học đã phát hiện và phân lập chất maytenfolone A và celasdine B của C. hindsii có khả năng gây độc tế bào mạnh đối với các dòng tế bào ung thư, cũng như chống lại sự sao chép của HIV hoạt động [4].

Các hợp chất phenolic có nhiều dược lý các hoạt động, chẳng hạn như khả năng chống oxy hóa và chống viêm, và cho thấy sự ức chế mạnh mẽ chống lại bệnh tim mạch, ung thư và tiểu đường. Bên cạnh đó, chất chống oxy hóa đã được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp và y học. Khả năng phản ứng của họ có thể giúp ngăn ngừa lão hóa, kháng khuẩn, kháng viêm, hủy hoại tế bào và chống ung thư [9].

Nghiên cứu này được thực hiện để đánh giá hoạt động chống oxy hóa, tổng hàm lượng phenolic (TPC), và tổng hàm lượng flavonoid (TFC) của C. hindsii. Việc xác định các thành phần hoạt động đã được tiến hành để xác định các hợp chất chịu trách nhiệm về tiềm năng chống oxy hóa của cây này bằng cách sử dụng phương pháp sắc kí (GC-MS) và (EIS-MS) để phân tích.

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Nguyên liệu thực vật

• Lá cây C. hindsii được thu hái ở xã Cao Dương, huyện Lương Sơn, tỉnh Hòa Bình, Việt Nam.
• Mẫu được làm khô trong tủ sấy ở 30 ◦C trong một tuần, và sau đó nghiền thành bột thành bột mịn.

Chuẩn bị chiết xuất

• Ngâm 1,12 kg bột C. hindsii trong metanol trong 30 ngày ở điều kiện môi trường xung quanh.
• Sau đó, chiết xuất metanol thô được tách bằng hexan, etyl axetat, và dung dịch nước để thu được lần lượt các dịch chiết 33,32 g, 133,33 g và 55,30 g.
• Chiết xuất EtOAc, được phân đoạn bằng sắc ký cột sử dụng kỹ thuật gradient rửa giải (cloroform và metanol) để thu được 14 phân đoạn (Bảng 1).
• Quá trình chưng cất phân đoạn của chiết xuất EtOAc.

Xác định tổng hàm lượng phenolic

• Hàm lượng phenol được đánh giá bằng phương pháp Folin-Cicalteau [13].
• Các mẫu thử nghiệm được trộn với 0,125 mL thuốc thử Folin-Ciocalteu và sau đó lắc trong 6 phút. Sau đó, thêm 1,25 mL Na2CO3 7% vào.
• Các dung dịch hỗn hợp được điều chỉnh bằng methanol đến thể tích 3 mL, trộn kỹ và ủ ở nhiệt độ môi trường trong điều kiện tối.
• Độ hấp thụ sau đó được ghi lại ở bước sóng 765 nm.
• Tổng hàm lượng phenol được biểu thị bằng miligam đương lượng axit gallic trên gam dịch chiết hoặc phần (mg GAE / g dịch chiết) theo đường cong chuẩn.
• Tất cả các mẫu được phân tích trong 3 lần lặp lại.

Xác định tổng hàm lượng flavonoid

• Tổng hàm lượng flavonoid của C. hindsii được xác định bằng phương pháp màu nhôm clorua [14].
• Cho 100 µL nhôm (III) clorua hexahydrat (2%) vào 100 µL mẫu chuẩn rutin.
• Sau khi ủ ở nhiệt độ phòng và trong điều kiện tối trong 15 phút, độ hấp thụ được đo ở bước sóng 430 nm.
• Tổng hàm lượng flavonoid là được tính theo đường cong chuẩn và được biểu thị bằng mg rutin đương lượng trên mỗi g dịch chiết hoặc phần (mg RE / g chiết xuất)

Tính chất chống oxy hóa

Phương pháp 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)

• Hoạt tính chống oxy hóa của chiết xuất và các phân đoạn cô lập được ước tính bởi phương pháp DPPH [15].
• Trộn hỗn hợp chứa 0,5 mL mỗi mẫu, 0,25 mL 0,5 nM DPPH, và 0,5 mL dung dịch đệm axetat 0,1 M (pH 5,5) được chuẩn bị và đặt trong bóng tối trong 30 phút ở điều kiện môi trường xung quanh.
• Độ hấp thụ của phản ứng được ghi lại ở bước sóng 517 nm bằng cách sử dụng đầu đọc vi tấm (Máy quang phổ MultiskanTM Microplate, Thermo Fisher Scientific, Osaka, Nhật Bản).
• Khả năng chống oxy hóa của các mẫu thử nghiệm được tính theo công thức sau:
• Hoạt động chống gốc tự do DPPH (%) = [(C – S) / C] × 100 (trong đó S và C là độ hấp thụ tương ứng của phản ứng có mẫu và phản ứng không có mẫu.)
• Kết quả là được biểu thị bằng giá trị IC50, xác định nồng độ của mẫu cần thiết để quét 50% của DPPH.

 Phương pháp 2,20-Azinobis (3-Ethylbenzothiazoline -6-sulfonic acid) (ABTS)

Phương pháp ABTS được sử dụng để đánh giá đặc tính chống oxy hóa của C. hindsii [16].

Thử nghiệm tẩy trắng β-Caroten

Phương pháp tẩy trắng β-caroten được sử dụng để đánh giá hoạt tính chống oxy hóa của C. hindsii [17].

Xác định các thành phần hóa học bằng phương pháp sắc ký khí-khối phổ (GC-MS)

• Các thành phần hóa học của các phân đoạn hoạt động được xác định bằng cách sử dụng hệ thống GC-MS (JMS-T100 GVC, JEOL Ltd., Tokyo, Japan), theo các phương pháp trước đây [18,19].
• Phân tích được tiến hành trong cột DB-5MS (30 m × 0,25 mm, dày 0,25 µm) sử dụng heli làm khí mang, được thực hiện với tỷ lệ phân chia 5: 1.
• Nhiệt độ kim phun và đầu dò được duy trì ở 300 ◦C và 320 ◦C.
• Nhiệt độ lò được thiết lập như sau: nhiệt độ bạn đầu 50 ◦C , tăng 10 ◦C / phút đến 300 ◦C, với thời gian giữ 20 phút.
• Các mẫu được pha loãng trong MeOH, và thể tích tiêm của mỗi mẫu là 1 µL.
• Phạm vi khối lượng quét từ 29 amu đến 800 amu.

Phân tích khối phổ-ion hóa tia điện tử (ESI-MS)

• Các mẫu được phân tích bằng ESI-MS ở cả chế độ ion âm và dương.
• Mao mạch nhiệt độ được đặt ở 140 ◦C (120 ◦C đối với S2) và điện áp phun là 3.0 KV (2.7 Kv đối với S2).
• Bên trong chế độ tích cực, các phân tích hợp chất được thực hiện trong điện áp phun ion 3000 V và mao quản nhiệt độ 350 ◦C.
• Các đỉnh được quét từ 280 đến 1000 m / z [20].

Phân tích thống kê

Phân tích thống kê được thực hiện bằng cách sử dụng ANOVA một chiều, sự khác biệt đáng kể (p <0,05) trong số các mẫu thử nghiệm. Kết quả được biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± sai số tiêu chuẩn.

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Hoạt động chống oxy hóa, Tổng hàm lượng Phenolic (TPC) và Tổng hàm lượng Flavonoid (TFC) của C. hindsii

• Dịch chiết EtOAC thu được lượng TPC và TFC tối đa lần lượt là 371,19 và 124,011 mg GE / g chiết xuất. Kết quả cho thấy TPC, TFC và hoạt tính chống oxy hóa của các chất chiết xuất được thử nghiệm đa dạng. Trong số các chất chiết xuất, EtOAc có TPC cao nhất (371,19 mg GAE / g chiết xuất) và TFC (124,77 mg RE / g trích).
• Tương tự, hoạt động chống oxy hóa của chiết xuất này cũng mạnh nhất (IC50 DPPH và ABTS tương ứng là 53,38 và 91,08 µg / mL) so với các chất chiết xuất khác, trong khi hexan chiết xuất không cho thấy bất kỳ hoạt động chống oxy hóa. Do hoạt động chống oxy hóa mạnh nhất của nó, EtOAc dịch chiết sau đó được tách bằng sắc ký cột bằng kỹ thuật rửa giải gradient.

Bảng 2. Hoạt động chống oxy hóa, tổng hàm lượng phenolic và tổng hàm lượng flavonoid của các chất chiết

Tổng số Phenolic (TPC) và Tổng hàm lượng Flavonoid (TFC), và Hoạt động chống oxy hóa của các phần được phân tách từ EtOAc

Nói chung, ngoại trừ P14, các phân số từ P9 – P13 cho thấy TPC và TFC lớn hơn đáng kể so với phân số P1-P8. Trong số này, TPC và TPC tối đa là quan sát thấy trên các phân đoạn P12-P12, trong đó độ pha loãng giữa cloroform và metanol nằm trong khoảng từ 50–70%. Khi tỷ lệ metanol <30% và> 90%, TPC và TFC đều giảm. Khả năng chống oxy hóa của các phần tỷ lệ tương ứng với lượng TPC và TFC.

Bảng 3. Hàm lượng TPC, TFC và hoạt động chống oxy hóa của mười bốn phần được tách ra từ Chiết etOAc bằng sắc ký cột.

Kết quả chỉ ra rằng, độ pha loãng giữa cloroform và metanol mạnh ảnh hưởng đến tiềm năng chống oxy hóa của C. hindsii, được phản ánh bởi cả hoạt động chống oxy hóa của ABTS và DPPH qua các giá trị IC50.

Trong số các mẫu này, IC50 thấp hơn cho thấy chất chống oxy hóa mạnh hơn Hoạt động. Các phân đoạn P1 – P4, P6 và P8 không cho thấy bất kỳ hoạt động chống oxy hóa nào và khi pha loãng metanol là 5%, chỉ quan sát thấy khả năng chống oxy hóa không đáng kể. Tuy nhiên, khi pha loãng metanol tăng lên> 10%, các hoạt động thu gom gốc ABTS và DPPH được tăng lên nhanh chóng.

Điện thế ABTS và DPPH tối đa được tìm thấy trong các phân đoạn P12 – P13, trong đó phần trăm methanol đã được tăng lên 50-70%. Tuy nhiên, khi độ pha loãng metanol vượt quá 70%, khả năng chống oxy hóa ngược lại đã giảm (Bảng 3). So sánh với BHT tiêu chuẩn, các phân số P12 – P13 có tiềm năng nhất, có thể chứa các thành phần hoạt động trong hoạt động chống oxy hóa, trong đó chất chống oxy hóa mức độ của các hợp chất riêng lẻ cần phân tích thêm.

Kết quả của thử nghiệm này cho thấy sự pha loãng metanol ở 50–70% kết hợp với cloroform cung cấp tiềm năng chống oxy hóa tối đa trong cả hoạt động thu dọn gốc ABTS và DPPH của cây thuốc C. hindsii. Ngược lại, khi metanol chiếm 90% dung dịch, cả hoạt động loại bỏ gốc DPPH và ABTS đều giảm nhanh chóng (Bảng 3).

Khả năng chống oxy hóa của C. hindsii cũng được đo bằng β-caroten phương pháp tẩy trắng, như trong Bảng 3. Hoạt tính chống oxy hóa được biểu thị bằng giá trị% LPI so với quá trình oxy hóa β-caroten. Hầu hết các phân đoạn từ dịch chiết etyl axetat đều có hoạt tính chống oxy hóa.

Giá trị LPI phần trăm của các phân đoạn EtOAc nằm trong khoảng từ 57% đến 90% (Bảng 3). Nó đã được quan sát rằng tất cả các dịch chiết được điều chế từ C. hindsii đều làm giảm quá trình oxy hóa của β-caroten, mặc dù mức độ sự ức chế khác nhau giữa các phân đoạn.

Trong số các phần cô lập, quá trình oxy hóa axit linoleic có hiệu quả bị ức chế bởi phân đoạn P12 (C: M = 1: 1; LPI = 90%), tiếp theo là phân đoạn P13 (98%) và P9 (87%). Những Các phân đoạn thể hiện mức độ chống oxy hóa gần với mức BHT tiêu chuẩn (Bảng 3). Kết quả này cho thấy C. hindsii có khả năng chống oxy hóa mạnh.

Mối tương quan giữa hàm lượng phenolic và các hoạt động chống oxy hóa

Các mối quan hệ của hoạt động chống oxy hóa được chỉ ra bởi xét nghiệm DPPH hoặc ABTS với tổng số phenol của C. hindsii lần lượt được trình bày trong Hình 2 và Hình 3.

Hình 2. Mối quan hệ giữa hoạt động chống oxy hóa và tổng số phenol

Kết quả cho thấy tổng số phenol tỷ lệ với hoạt động thu dọn gốc DPPH (r2 = 0,80) hoặc quét gốc ABTS (r2 = 0,62). Các phân đoạn có tổng hàm lượng phenolic cao có khả năng chống oxy hóa cao trong cả hai xét nghiệm DPPH và ABTS.

Xác định các hợp chất hoạt tính sinh học bằng GC-MS và ESI-MS

Các phân đoạn hoạt tính sinh học bao gồm P1, P4 – P14 được phân tích bởi GC-MS và EIS-MS để tiết lộ sự hiện diện của các hợp chất chính, bao gồm axit hexadecanoic, α-amyrin, β-amyrin, hydrazine carboxaminde, (3β) -D: C-Friedours-7-en-3-ol, fucosterol, β-sitosterol, phytol, dihydroxylacetone, rutin, glycerin, 2′-hydroxyacetophenone và 2-hydroxy-1-ethyl ester (Bảng 4).

Diện tích đỉnh (%) được sử dụng để so sánh nồng độ của các hợp chất được phát hiện trong mỗi phần. Người ta thấy rằng sự hiện diện và nồng độ của các thành phần được xác định là khác nhau giữa các phần P1 và P4–P14.

Trong số các phân đoạn này, cả α-amyrin và β-amyrin đều cho thấy nồng độ tối đa trong P1 và P4 (25,56–57,67%). β-amyrin trong P5 và P7 chiếm số lượng lớn hơn α-amyrin, tuy nhiên, α-amyrin chiếm 31,74% trong P8, trong khi không có dấu vết của β-amyrin được quan sát thấy trong phân số. Tuy nhiên, cả α-amyrin và β-amyrin đều không được phát hiện trong các phân đoạn P9 – P14 (Bảng 4).

Với ngoại trừ P1, hợp chất hydrazine carboxamide được tìm thấy trong tất cả các phân đoạn P4–14. Phân số P4 cho thấy nồng độ tối đa (38,64%), tiếp theo là P13 (21,43%), trong khi các phân đoạn khác cho thấy số lượng thấp hơn (1,84–13,75%) (Bảng 4).

Axit hexadecenoic chỉ được xác định trong P1, P10 và P11, trong đó P10 có số lượng nhiều hơn (13,09%). Các hợp chất chính khác bao gồm fucosterol (43,62%, P5), (3β) -D: C-Friedours-7-en-3-ol (29,3%, P5), rutin (7,45%, 12,46% và 7,43% trong P9, P10, và P13, tương ứng), và 2-hydroxy-1-etyl este (20,22%, P13) (Bảng 4). Các hóa chất được xác định khác chiếm số lượng thấp hơn nhiều (<5%).

Bảng 4. Thành phần hóa học trong các phân đoạn P1-P14

THẢO LUẬN

Theo các nghiên cứu trước đây, C. hindsii có tác dụng chống ung thư và chống viêm các hoạt động [2–4]. Tuy nhiên, đây là nghiên cứu đầu tiên mô tả tiềm năng TPC và TFC của C. hindsii.

Tổng hàm lượng phenolic và tổng số flavonoid của cây C. hindsii có thể đóng góp quan trọng vai trò trong các hoạt động sinh học mạnh mẽ của chúng. Việc xác định hoạt tính chống oxy hóa rất quan trọng trong việc ước tính thuốc và tiềm năng dược phẩm của một nhà máy.

Qua nghiên cứu đã cho thấy, DPPH và ABTS có hoạt động mạnh nhất trong phần etyl axetat, tiếp theo là dung dịch nước, trong khi hexan không có hoạt tính (Bảng 2). Tương tự, chiết xuất phân đoạn etyl axetat cho thấy TPC tối đa và hoạt động của TFC, trong khi hexan có mức thấp nhất (Bảng 2). Do đó, có thể thấy rằng TPC và TFC tỷ lệ thuận với khả năng chống oxy hóa của C. hindsii.

Ngoài ra, kết quả trong Hình 1 và Hình 2 và Bảng 3 cho thấy rằng các hoạt động chống gốc tự do của DPPH và ABTS tương ứng với độ pha loãng giữa cloroform và metanol. Trong số các mẫu này, tỷ lệ metanol ở mức 50-70% đạt được khả năng chống oxy hóa cao nhất.

Trong nghiên cứu này, sử dụng phương pháp GC-MS và ESI-MS, đã phát hiện được 15 hợp chất chính thuộc về axit béo, amit, flavonoid, sterol, terpene, và nhóm phenol. Trong số đó, α-amyrin, β-amyrin, hydrazine carboxamide, hexadecanoic axit, fucosterol, (3β) -D: C-Friedours-7-en-3-ol, rutin, và 2-hydroxy-1-etyl este chiếm tối đa số lượng, trong khi nồng độ của các thành phần khác <5%.

Rutin là một trong những flavonoid dồi dào, đã được nghiên cứu là chất chống oxy hóa tiềm năng của C. hindsii [38,39]. Ngoài ra, hợp chất này đã được báo cáo là có hiệu quả trong điều trị các phản ứng dị ứng [39], viêm, giãn mạch, phát triển khối u, nhiễm trùng do vi khuẩn và vi rút, và nhiễm trùng động vật nguyên sinh [40]. Những các hoạt động dược lý của rutin chủ yếu là do đặc tính chống oxy hóa của nó, đặc biệt là người nhặt rác gốc tự do [41–43].

Kết quả của nghiên cứu này cho thấy rằng C. hindsii chứa nhiều hợp chất hoạt tính sinh học có thể khai thác cho mục đích y tế và dược phẩm.

KẾT LUẬN

• Nghiên cứu này quan sát thấy rằng ethyl acetate là dung môi chiết xuất hiệu quả nhất để chiết xuất tiềm năng chất chống oxy hóa từ C. hindsii.
• Việc sử dụng metanol 50–70% kết hợp với cloroform được cung cấp hoạt động thu dọn gốc DPPH và ABTS tối đa.
• Các phân tích GC-MS và ESI-MS cho thấy sự hiện diện của 15 hợp chất, với các thành phần chính là α-amyrin, β-amyrin, hydrazine carboxamit, axit hexadecanoic, fucosterol, (3β) -D: C-Friedours-7-en-3-ol, rutin, và 2-hydroxy-1-etyl este.

Nguồn: Tran Duc Viet, Tran Dang Xuan, Truong Mai Van, Yusuf Andriana, Ramin Rayee, Hoang-Dung Tran (2019), Comprehensive Fractionation of Antioxidants and GC-MS and ESI-MS Fingerprints of Celastrus hindsii Leaves, Medicines, 6, pp. 64.

Chia sẻ

Chia sẻ

Tiểu ban Tài nguyên sinh vật

Cây An xoa (Helicteres hirsuta Lour.) còn được gọi là dó lông, thường dùng làm thuốc chữa ung nhọt; rễ làm thuốc dịu đau, tiêu độc, kiết lị, cảm cúm, đậu, sởi, sốt rét và rắn độc cắn; vỏ thân cho sợi dùng dệt bao tải (Võ Văn Chi, 2012). Các nghiên cứu gần đây, đã phân lập được một số hợp chất Lignan có tác dụng gây độc với các tế bào ung thư như Pinoresinol, Medioresinol, Syringaresinol, Boehmenan, Boehmenan H, Dihydrodiconiferyl alcohol (Chin et al., 2009); Đã phân lập được một số chất: Acid 3-O-acetylbetulinic; 7,4‟-di-Omethylisoscutellarein, stigmasterol (Nguyễn Thành Triết và cộng sự 2015). Trong nghiên cứu này, thành phần sử dụng của cây An xoa là phần trên mặt đất (thân, cành, lá, hoa) với mục đích khảo sát khả năng kháng khuẩn và hoạt tính chống oxy hóa.

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Nguyên liệu

• An xoa (Helicteres hirsuta Lour.) được thu hái tại phường An Tây, tỉnh Thừa Thiên – Huế vào tháng 1/2017.

Hình ảnh cây An xoa

Phương pháp nghiên cứu

1. Phương pháp xử lý mẫu:

• Sau khi thu mẫu về rửa sạch, cắt nhỏ và xử lý mẫu theo hai phương pháp
• Sấy khô ở nhiệt độ 40oC (M1)
• Phơi bóng râm kết hợp sao vàng hạ thổ theo kinh nghiệm dân gian (M2)
• Sau đó, đem xay thành bột thô.

2. Phương pháp chiết phân đoạn (chiết rắn – lỏng và chiết lỏng – lỏng):

Chiết rắn – lỏng: Cho bột nguyên liệu vào trong bình thủy tinh, rót methanol tuyệt đối vào đến khi vừa ngập mẫu, ngâm ở điều kiện thường trong 5 ngày. Tiến hành chiết rút, lọc loại bỏ phần bã nguyên liệu, thu dịch lọc. Đưa dịch chiết vừa lọc được cô cạn trên nồi cách thủy cho đến khi thu được cao sệt, thu được cao toàn phần methanol (ký hiệu CPm). Cân cao toàn phần, sử dụng 80% cao toàn phần để phân tán trong nước (20% cao còn lại tiến hành khảo sát hoạt tính sinh học). Tính hiệu suất cao chiết.

Chiết lỏng – lỏng: Cho cao toàn phần phân tán trong nước và chiết với dung môi n-hexan có tỷ lệ 1:1 (nước cất : n-hexan), loại dung môi trên nồi cách thủy thu được cao chiết n-hexan (ký hiệu CPh). Chiết lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dần như: chloroform, ethyl acetate, nước tương tự dung môi n-hexan thu được cao chiết tương ứng, ký hiệu CPc, CPe, CPn. Tất cả các thí nghiệm lặp lại 3 lần, tính hiệu suất chiết các cao thu được ở hai phương pháp xử lý mẫu M1, M2.

Thử hoạt tính kháng vi sinh vật: Theo phương pháp khuếch tán trên thạch theo tỷ lệ 1:10 (Gomez-Flores et al., 2006). Các chủng vi sinh vật (VSV) kiểm định đại diện gây bệnh cho người: Vi khuẩn Gram (-): Escherichia coli (E. coli); Salmonella typhi (S. typhi) và vi khuẩn Gram (+): Staphylococcus aureus (S. aureus); Streptococcus faecalis (S. faecalis).

Phương pháp thử hoạt tính chống oxy hóa bằng DPPH: Các cao chiết ở trên được pha thành các nồng độ 100; 50; 25,5; 12,5; 6,25 μg/ml trong methanol. Lấy 1,5ml cao chiết thêm 1,5ml DPPH 60μM lắc đều và để yên trong bóng tối 30 phút, sau đó được đo độ hấp thu quang phổ ở bước sóng 517 nm (Marinova et al., 2011). Sử dụng ascorbic acid (Vit. C) làm đối chứng để tính hàm lượng chất oxy hóa tương đương.

Phương pháp xử lý số liệu: Các số liệu thực nghiệm được xử lý thống kê bằng chương trình MS-Excel 2010 và SPSS 16.0.

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

Hàm lượng các cao chiết cây An xoa (Helicteres hirsuta L.)

Kết quả ở bảng 1 cho thấy việc xử lý mẫu có ảnh hưởng đáng kể đến hiệu suất chiết.

• Hiệu suất chiết ở phương pháp xử lý mẫu sấy khô (M1) từ 0,22 – 9,96%, phương pháp vàng hạ thổ (M2) từ 0,14 – 6,81%.
• Hiệu suất chiết các cao M1 luôn cao hơn so với các cao M2.

Hoạt tính kháng khuẩn của các cao chiết cây An xoa (Helicteres hirsuta L.)

Tính kháng khuẩn là một trong những tác dụng sinh học được quan tâm của các cây dược liệu. Tác dụng này có liên quan chặt chẽ với các hợp chất quan trọng như: saponin, tanin, flavonoid,… Nghiên cứu đã cho thấy các cao chiết cây An xoa đều có khả năng kháng với 4 loại vi sinh vật kiểm định. Kết quả được trình bày ở bảng 2 và bảng 3.

Hoạt tính kháng khuẩn đối với các VSV gây bệnh của các cao chiết như sau:

Các cao chiết ở phương pháp xử lý mẫu sấy khô kháng mạnh (M1) đối với 4 VSV kiểm định.

• Hiệu số vòng vô khuẩn ở vi khuẩn E. coli đạt từ 14,35 – 19,24 mm, ở vi khuẩn S. typhi đạt từ 20,35 – 25,05 mm, ở vi khuẩn S. aureus đạt từ 14,35 – 21,35 mm còn đối với S. faecalis đạt từ 17,34 – 20,65 mm.
• Trong các cao chiết, cao chiết CPm kháng khuẩn mạnh và khá đều trên cả 4 chủng VSV, đối với S. typhi hiệu số vòng vô khuẩn đạt đến 25,05 mm.

Các cao chiết ở phương pháp xử lý mẫu sao vàng hạ thổ (M2) kháng mạnh đối với 4 VSV kiểm định. Hiệu số vòng vô khuẩn ở vi khuẩn E. coli đạt từ 12,35 – 18,25 mm, ở vi khuẩn S. typhi đạt từ 19,68 – 23,90 mm, ở vi khuẩn S. aureus đạt từ 14,50 – 20,38 mm còn đối với S. faecalis đạt từ 16,77 – 18,65 mm.

Nhìn chung hoạt tính kháng khuẩn của các cao chiết ở hai phương pháp xử lý mẫu là khá cao và khác nhau đối với các chủng vi khuẩn nghiên cứu. Kết quả này là cơ sở ban đầu cho những nghiên cứu ứng dụng cây An xoa trong việc chữa một số bệnh liên quan đến các vi khuẩn gây bệnh.

Hoạt tính chống oxy hóa các cao chiết từ cây An xoa (Helicteres hirsuta L.)

Chất chống oxy hóa là một chất hoặc một nhóm hợp chất có ngăn ngừa và loại bỏ tác dụng độc hại của các gốc tự do một cách trực tiếp hoặc gián tiếp. Chất chống oxy hóa có thể trực tiếp phản ứng với các gốc tự do hoạt động để tạo ra những gốc tự do mới kém hoạt động hơn, từ đó có thể ngăn cản chuỗi phản ứng dây chuyền được khơi mào bởi các gốc tự do.

Kết quả kháng oxy hóa của các cao chiết ở hai phương pháp xử lý mẫu được trình bày trong hình 5. cho thấy, hiệu suất kháng oxy hóa của các cao chiết cây An xoa tỉ lệ thuận với nồng độ cao và khác biệt có ý nghĩa thống kê ở các nồng độ khảo sát. So sánh với đối chứng vit.C phương trình đường chuẩn (y = 0,466x + 48,391; IC50= 3,453; R2= 0,991).

Hoạt tính chống oxy hóa các cao chiết được đánh giá dựa trên giá trị IC50 cụ thể như sau:

• Các cao chiết ở phương pháp xử lý mẫu sấy khô (M1): cao chiết CPe có hoạt tính oxy hóa cao nhất với giá trị IC50 là 12,469 (gấp 3,61 lần so với đối chứng vit. C); cao chiết CPc có hoạt tính oxy hóa thấp nhất với giá trị IC50 là 39,129 (gấp 11,33 lần so với đối chứng vit. C)
• Các cao chiết ở phương pháp xử lý mẫu sao vàng hạ thổ (M2): cao chiết CPe có hoạt tính oxy hóa cao nhất với giá trị IC50 là 18,042 (gấp 5,23 lần so với đối chứng vit. C); cao chiết CPc có hoạt tính oxy hóa thấp nhất với giá trị IC50 là 45,271 (gấp 13,11 lần so với đối chứng vit. C).

Kết quả phân tích cho thấy, quá trình xử lý mẫu có ảnh hưởng tới hoạt tính chống oxy hóa. Từ hai phương pháp xử lý mẫu ban đầu, M1 luôn có hoạt tính chống oxy hóa cao hơn M2 ở các cao chiết tương ứng.

KẾT LUẬN

1. Hàm lượng các cao chiết An xoa ở các dung môi khác nhau:

• Ở phương pháp xử lý mẫu sấy khô (M1): Các cao chiết methanol (CPm), n-Hexan (CPh), chloroform (CPc), ethylacetat (CPe) và cao nước (CPn) có hiệu suất chiết lần lượt là 9,96%; 2,66%; 1,05%; 0,22%; 4,57%.
• Ở phương pháp xử lý mẫu sao vàng hạ thổ (M2): Các cao chiết CPm, CPh, CPc, CPe, CPn có hiệu suất chiết lần lượt là 6,81%; 2,71%; 0,79%; 0,14%; 3,40%.

2. Các cao chiết CF m, CFh, CPc, CFe, CFn ở hai phương pháp xử lý mẫu đều thể hiện hoạt tính kháng khuẩn mạnh với các loại vi sinh vật kiểm định. Trong đó đáng chú ý là loại VSV kiểm định Salmonella typhi là nhạy cảm nhất đối với tất cả các cao chiết.

3. Hoạt tính chống oxy hóa của các cao chiết cây An xoa ở hai phương pháp xử lý mẫu có hoạt tính chống oxy hóa mạnh khá mạnh (IC50< 100 μg/ml). Cao chiết CPe có hoạt tính oxy hóa cao nhất với giá trị IC50 là 12,469 (μg/ml) ở M1 và thấp nhất là cao chiết CPc với giá trị 45,271(μg/ml) ở M2.

Chia sẻ

Chia sẻ

Hầu hết chúng ta đều biết đến củ dền. Có người yêu thích vị mạnh mẽ, ngọt ngào một cách tự nhiên của nó. Có người lại không thể chịu được dù sử dụng dưới bất kỳ hình thức nào, kể cả nước ép. Tuy nhiên chúng ta không thể phủ nhận rằng củ dền đem lại rất nhiều lợi ích tuyệt vời cho người sử dụng nó.

1. Chứa nhiều chất chống oxy hóa

Chất chống oxy hóa là các hợp chất giúp trung hòa gốc tự do có hại, ngăn ngừa sự oxy hóa của cơ thể. Một số nghiên cứu đã phát hiện ra rằng chất chống oxy hóa có thể bảo vệ chúng ta chống lại một số bệnh mạn tính như tim mạch, tiểu đường, ung thư.

• Củ dền chứa rất nhiều chất dinh dưỡng thực vật có tác dụng phòng chống bệnh tật như các chất chống oxy hóa, vitamin và vi khoáng chất.
• Thực tế, củ dền là một nguồn tuyệt vời các loại thực phẩm dinh dưỡng nhất định được gọi là betalains có đặc tính chống oxy hóa và kháng viêm mạnh mẽ.

Các nhà nghiên cứu đã phát hiện ra rằng những sắc tố này có thể giúp chúng ta chống lại một số loại ung thư và bệnh tật. Thêm vào đó, củ dền cũng chứa một lượng lutein và zeaxanthin – hai carotenoid có vai trò quan trọng trong sức khỏe của đôi mắt và làm giảm nguy cơ các bệnh như thoái hóa điểm vàng, đục thủy tinh thể.

2. Giảm viêm

Trong nhiều trường hợp, viêm là một phản ứng bình thường của hệ miễn dịch giúp cơ thể chống lại kẻ xâm lược và sự nhiễm trùng từ bên ngoài. Tuy nhiên, bằng chứng cho thấy viêm mạn tính là gốc rễ của hầu hết các bệnh và có thể là nguyên nhân chính gây ra các bệnh mạn tính như tim mạch, ung thư và thậm chí béo phì.

Chế độ ăn bình thường của chúng ta đa phần đều chứa nhiều chất gây viêm, đường và rất ít hàm lượng chất dinh dưỡng. Do đó, việc tiêu thụ củ dền là một cách để ngăn ngừa viêm trong cơ thể.

• Trong một thử nghiệm trên chuột, việc bổ sung củ dền có thể làm giảm stress và viêm. Một nghiên cứu khác trên người cũng đã xác nhận các đặc tính chống viêm của củ dền, giảm dấu hiệu viêm ở người bị tăng huyết áp.

3. Thúc đẩy sức khỏe tim mạch

Bệnh tim mạch là một vấn đề lớn trên thế giới hiện nay. Theo một báo cáo được công bố Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ, ước tính gần 44% người Mỹ sẽ mắc một trong các bệnh tim mạch vào năm 2030.

Một trong những lợi ích lớn nhất của nước ép củ dền là khả năng thúc đẩy sức khỏe tim mạch. Củ dền là một nguồn giàu nitrat trong chế độ ăn uống. Nó hoạt động như một thuốc giãn mạch hỗ trợ việc cải thiện lưu lượng máu và hạ huyết áp trong các trường hợp cần thiết.

• Một nghiên cứu được công bố trên tạp chí Dinh dưỡng Anh cho thấy nước ép củ dền giúp hạ huyết áp tâm thu và tâm trương đáng kể ở những người tham gia sau 24 giờ.
• Một nghiên cứu khác vào năm 2017 cho thấy nước ép củ dền làm giảm mức LDL cholesterol xấu trên những người mắc chứng không kiểm soát được huyết áp.

4. Hỗ trợ giải độc

Cơ thể giúp bạn loại bỏ độc tố bằng cách sử dụng hệ thống giải độc của bản thân. Thận lọc máu và tạo ra nước tiểu, phổi thải CO2, da đẩy các hạt qua lỗ chân lông và ruột loại bỏ chất thải ra khỏi cơ thể. Gan cũng đóng một vai trò quan trọng trong giải độc bằng cách loại bỏ độc tố và các chất độc hại khác khỏi máu.

Nước củ dền có tác dụng cải thiện chức năng gan, giữ cho nó hoạt động hiệu quả. Một mô hình thử nghiệm trên động vật tại Ba Lan đã cho thấy việc điều trị củ dền giúp ngăn ngừa oxy hóa và làm giảm lipid peroxidation (một dấu hiệu của tổn thương tế bào). Tương tự, một thử nghiệm khác cũng cho thấy rằng nước củ dền giúp tăng nồng độ các enzyme có tác dụng giải độc trong cơ thể.

5. Tăng cường chức năng não bộ

Khi bạn già đi, việc mắc các bệnh như alzheimer và parkinson trở nên phổ biến hơn bởi ảnh hưởng của việc suy giảm chức năng tinh thần và nhận thức ở não.

Để bảo vệ sức khỏe cho não bộ và giúp giảm suy giảm nhận thức, việc cung cấp một chế độ ăn có hàm lượng nitrat cao là vô cùng quan trọng. Và củ dền là một trong những thực phẩm làm nên lợi ích ấy.

• Trên thực tế, một vài nghiên cứu đã cho thấy việc ăn nhiều nitrat còn giúp tăng lưu lượng máu đến những khu vực nhất định của não bộ liên quan đến chức năng điều hành.

6. Hỗ trợ sức khỏe tiêu hóa

Củ dền chứa nhiều chất xơ rất tốt cho đường ruột. Chất xơ di chuyển qua đường ruột mà không được hấp thụ, thêm vào phân để hỗ trợ việc tiêu hóa được đều đặn.

• Một nghiên cứu cho thấy việc tăng lượng chất xơ dẫn đến sự gia tăng tần suất đại tiện cho những người bị táo bón.
• Không chỉ vậy, nó còn tốt cho sức khỏe theo những cách khác như chống lại các tình trạng viêm ruột thừa, trĩ và một số bệnh khác.

7. Nâng cao hiệu quả tập luyện

Cho dù bạn là một vận động viên hay chỉ đơn thuần là tự rèn luyện thể dục, củ dền đã được chứng minh là có tác động mạnh mẽ đến việc nâng cao hiệu suất cho tập luyện. Điều này được giải thích bởi nitrat có tác dụng cải thiện hiệu quả của ty thể – cơ quan chịu trách nhiệm tạo ra năng lượng cho các tế bào trong cơ thể bạn.

Một nghiên cứu năm 2011 cho thấy việc tiêu thụ nước ép củ dền đã cải thiện đáng kể hiệu suất đi xe đạp, kéo dài thời gian bền sức và tăng khả năng chịu đựng với cường độ cao của những người tham gia nghiên cứu.

Nguồn: Viện Y học Ứng dụng Việt Nam

Chia sẻ

Chia sẻ